mini-MPN-STE-qPCR法快速定量检测食品中沙门氏菌

作者：章小洪; 陈卫平; 王伟影; 陈梦; 邹小龙; 饶琛; 郑连宝^*

来源：食品安全质量检测学报, 2021, 12(18): 7246-7253.

DOI：10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2021.18.021

• 沙门氏菌
• invA基因
• 荧光定量PCR
• mini-MPN
• 短时间增菌
• 定量检测

目的建立一种快速、简易、可定量检测食源性沙门氏菌定量PCR (quantitative PCR, qPCR)方法。方法依据沙门菌属invA基因序列设计染料法qPCR引物,建立沙门氏菌qPCR检测方法,并通过短时间增菌(short time enrichment, STE)的5管微型多管发酵计数法(mini-most probable number, mini-MPN)进行定量检测,构建mini-MPN-STE-qPCR法。使用人工污染的鸡肉混合液进行定量检测,检测结果与传统MPN计数法和平板计数法进行比较分析。结果建立的qPCR法特异性良好,方法灵敏度为50CFU/mL,结合48孔板min-MPN和4 h短时间增菌,建立的mini-MPN-STE-qPCR法可将整个检测流程缩短至7 h。人工添加沙门氏菌的鸡肉混合液检测结果表明方法检出限为-0.347logMPN/mL,Bland-Altman分析结果显示,此法与传统MPN计数法相关系数r2=0.994,与平板计数法相关系数r2=0.992。结论该方法准确、简单易行、成本低、灵敏度高,可用于食品中沙门菌的快速定量检测。