摘要

目的建立酶联免疫吸附法(ELISA)以检测人尿液中胰蛋白酶原激活肽(TAP)的含量。方法以TAP-BSA交联抗原为包被抗原,TAP为竞争抗原,两者与定量的TAPmAb反应,建立检测TAP的间接竞争ELISA测定法。结果最佳抗原包被浓度为250ng/ml,最佳单抗工作浓度为25μg/ml,HRP-抗小鼠IgG工作浓度为1∶4000。可测量最适范围为0.69~1000ng/ml,灵敏度为0.69ng/ml,批内和批间变异系数分别为9.10%和10.33%,平均回收率为97.70%。结论建立了定量测定尿TAP含量的酶联免疫吸附试验。