甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白的原核表达、纯化及其免疫保护性

作者：王斌; 李娜; 董晓宇; 梁昊宇; 陈翠萍; 陈薇; 曾明

来源：中国生物制品学杂志, 2012, (06): 672-675.

DOI：10.13200/j.cjb.2012.06.17.wangb.001

• 甲型副伤寒沙门菌
• 细菌外膜蛋白质类
• BtuB蛋白
• 原核细胞
• 基因表达
• 免疫原性
• 免疫保护性 Salmonella paratyphi A
• Bacterial outer membrane proteins
• BtuB protein
• Prokaryotic cells
• Gene expression
• Immunogenicity
• Immune protection

目的原核表达、纯化甲型副伤寒沙门菌外膜BtuB蛋白,并检测其免疫原性和免疫保护性。方法采用PCR从甲型副伤寒沙门菌(CMCC 50973)基因组DNA中扩增btuB基因,插入原核表达载体pET-30a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经分子筛和亲和层析纯化后,免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠血清中抗BtuB IgG抗体效价,并用最小绝对致死剂量活菌攻毒,计算小鼠的保护率。结果重组原核表达质粒pET-30a-btuB经双酶切和测序证实构建正确;重组蛋白的相对分子质量约为67 000,表达量约为菌体总蛋白的25%,主要以包涵体形式表达;纯化的重组蛋白纯度...

• 单位
  中国食品药品检定研究院; 病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院