酪氨酸蛋白激酶配体EphrinB2蛋白靶向miRNA表达载体构建及其沉默效率评价

作者：潘佳忻; 张锋; 吴新民; 张志文

来源：中国新药杂志, 2010, (13): 1184-1188.

• 微小RNA
• RNA干扰
• 基因治疗
• 酪氨酸蛋白激酶配体
• EphrinB2
• 大鼠嗜铬细胞瘤细胞株PC12 miRNA
• RNA interference
• gene therapy
• ligand of receptor tyrosine kinase family
• EphrinB2
• rat pheochromocytoma cell PC12

目的:针对大鼠的Efnb2基因序列(目的蛋白EphrinB2),构建特异性干扰微小RNA(miRNA)及其表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR,并检测其对Efnb2基因的干扰作用。方法:根据NM001107328基因序列设计并合成4对miRNA oligo;将4对oligo退火成双链。然后用载体构建试剂盒进行重组克隆,将4对双链miRNA oligo分别插入到miRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR中,构建4个miRNA表达质粒,通过脂质体2000将已经构建好的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR干扰质粒转染至大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞中,通过qP...

• 单位
  北京大学第一医院; 北京大学