DHA对氧糖剥夺-复氧复糖损伤时小胶质细胞活化的影响

作者：冯燕; 王魁; 张霞婧; 邵勇平; 赵蔚^*

来源：中华麻醉学杂志, 2019, 39(08): 928-930.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-1416.2019.08.008

• 二十二碳六烯酸类
• 再灌注损伤
• 小神经胶质细胞

目的 评价二十二碳六烯酸(DHA)对氧糖剥夺-复氧复糖损伤时小胶质细胞活化的影响。方法 将N9小胶质细胞以104个/孔的密度接种于96孔细胞培养板培养3～5 d,采用随机数字表法分为3组(n＝18)：对照组(C组)、氧糖剥夺-复氧复糖组(OGD/R组)和DHA＋氧糖剥夺-复氧复糖组(DHA＋OGD/R组)。C组37 ℃培养箱(95%空气-5%CO2)中培养24 h；OGD/R组和DHA组将培养基更换为无糖培养基,置于37 ℃培养箱(95%N2-5%CO2)中培养12 h,随后将培养基更换为正常培养基,37 ℃培养箱(95%空气-5%CO2)中继续培养24 h,制备氧糖剥夺-复氧复糖损伤模型。DHA组于氧糖剥夺前12 h时加入25 μmol/L DHA孵育。采用MTT法测定细胞活力,采用化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性,采用免疫荧光染色法计数活化小胶质细胞,采用Western blot法检测小胶质细胞活化标志物iba-1表达水平,采用ELISA法检测培养基TNF-α、IL-6、IL-4和IL-10的浓度。结果 与C组比较,OGD/R组和DHA＋OGD/R组细胞活力降低,LDH活性升高,活化小胶质细胞计数增多,iba-1表达上调,OGD/R组TNF-α和IL-6浓度升高,DHA＋OGD/R组TNF-α、IL-6、IL-4和IL-10浓度升高(P<0.05)；与OGD/R组比较,DHA组细胞活力升高,LDH活性降低,活化小胶质细胞计数减少,iba-1表达下调,TNF-α和IL-6浓度降低,IL-4和IL-10浓度升高(P<0.05)。结论 DHA减轻氧糖剥夺-复氧复糖损伤的机制可能与抑制小胶质细胞活化,减轻炎症反应有关。

• 单位
  西安交通大学第二附属医院; 西安市第四医院