摘要
目的探讨柯萨奇病毒(CVB3)心肌炎细胞毒T细胞(CTL)亚类(ACTL、VCTL、MCTL)TCR CDR3VΒ基因取用格局。方法无菌摘取72H内新生BALB/C鼠心脏,培养单层心肌细胞并将其分为三组,分别用CVB3、放线菌素D处理和不经过任何处理;实验组制备CVB3心肌炎鼠模型,处死后将其肠系膜淋巴结制成单细胞悬液,分别加入上述三组单层心肌细胞,采用免疫吸附法获取ACTL、VCTL、MCTL,对照组鼠为正常小鼠处死后取肠系膜淋巴结制成单细胞悬液;采用MTT法对实验组ACTL、VCTL、MCTL和对照组T细胞进行细胞毒鉴定;常规进行RT-PCR,判断实验组细胞及对照组细胞的TCR VΒ基因取用格局。结果对照组T细胞表达VΒ基因全部20个家族,而实验组三类CTL的VΒ基因取用格局呈现明显的限制性,ACTL优势表达VΒ6、VΒ8.1、VΒ8.2、VΒ8.3,MCTL优势表达VΒ5.1、VΒ8.1、VΒ8.2、VΒ8.3,而VCTL优势表达VΒ7、VΒ8.1、VΒ8.2、VΒ8.3。结论CVB3心肌炎中导致心肌细胞损伤的CTL受到特异性抗原刺激后其TCR VΒ基因取用格局呈现明显的限制性。
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单位四川大学; 四川大学华西医院; 四川大学华西第二医院