摘要
目的构建DGCR8基因敲除小鼠以及小鼠胚胎成纤维细胞(Mef)模型,探讨DGCR8对小鼠生长发育的影响,以期为胎儿生长受限(FGR)寻找新的靶点。方法通过基因型为DGCR8loxp/loxp和含有β-actin-Cre-ERT2的小鼠模型进行繁殖,获得基因型为DGCR8loxp/loxp(对照组)和DGCR8loxp/loxp/actin-cre(实验组)可诱导型基因敲除小鼠。在小鼠出生后第14天注射4 mg他莫昔芬,首次测量14日龄的小鼠体质量,以后每3 d测量一次体质量,比较对照组和实验组小鼠的体质量。采用同样的方法构建胚胎期基因型为DGCR8loxp/loxp和DGCR8loxp/loxp/actin-cre小鼠模型,提取胚胎期Mef,检测Mef细胞中信号蛋白磷酸化的细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)、增殖细胞核抗原(PCNA)的水平。结果 DGCR8基因敲除小鼠的生长速度低于正常小鼠,DGCR8敲除Mef细胞中p-ERK1/2、PCNA的表达量低于正常Mef细胞(P<0.05)。结论 DGCR8基因敲除小鼠及Mef细胞生长发育受限,DGCR8基因与小鼠生长发育受限密切相关,DGCR8有望成为FGR的基因靶点。
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单位河南省人民医院; 郑州大学第三附属医院