摘要
背景:既往研究表明人牙髓干细胞具有良好的成骨分化潜能,是骨组织工程中潜在的种子细胞,目前重组人生长激素对人牙髓干细胞的增殖及成骨分化的作用尚不明确。目的:探究重组人生长激素对人牙髓干细胞增殖及成骨分化的影响。方法:采用组织块培养法分离培养人牙髓干细胞,根据药物浓度梯度筛选后,选取10,100,250,500,1 000μg/L重组人生长激素干预为实验组,正常培养基培养为对照组。在干预后第1,3,5,7天采用CCK-8法检测人牙髓干细胞的增殖情况。选取含10,100,250,500,1 000μg/L重组人生长激素的成骨诱导液干预人牙髓干细胞,在诱导第7天,采用碱性磷酸酶染色及其半定量分析法检测碱性磷酸酶活性,采用荧光定量RT-qPCR检测成骨相关基因Ⅰ型胶原蛋白、骨钙素、Runt相关转录因子2的mRNA表达,在诱导第14天,采用茜素红染色观察成骨矿化情况。结果与结论:(1)CCK-8检测结果显示,从干预第3天开始,100,250,500,1 000μg/L重组人生长激素均能促进人牙髓干细胞增殖,与对照组相比差异有显著性意义(P <0.01);(2)与对照组比较,100,250,500μg/L重组人生长激素组人牙髓干细胞的碱性磷酸酶活性显著升高(P <0.01);100,250μg/L重组人生长激素组人牙髓干细胞的茜素红染色矿化结节数显著增多(P <0.01);250μg/L重组人生长激素组Ⅰ型胶原蛋白、骨钙素的mRNA表达量升高(P <0.05,P <0.01),100,250μg/L重组人生长激素组Runt相关转录因子2的mRNA表达量升高(P <0.01);(3)上述结果表明,250μg/L重组人生长激素更适合促进人牙髓干细胞增殖和成骨分化。
-
单位贵州医科大学; 贵阳市口腔医院