人表皮角质形成细胞桥粒芯糖蛋白4胞外区域基因片段的克隆

作者：李薇; 冯云; 黎静宜; 李福民; 冉玉平

来源：中国临床康复, 2006, (09): 43-45.

• 桥粒
• 糖蛋白类
• 逆转录聚合酶链反应
• 基因扩增

目的:扩增人表皮角质形成细胞桥粒芯糖蛋白4胞外区域EC1,EC2,EC3和EC4的核酸序列。方法:实验于2004-11/2005-09在四川大学华西医学中心感染免疫研究室完成。通过反转录聚合酶链反应法从人正常皮肤组织表皮角质形成细胞中抽提RNA,反转录合成cDNA,聚合酶链反应扩增表皮角质形成细胞桥粒芯糖蛋白4胞外区域EC1,EC2,EC3和EC4目的基因;应用基因重组技术将目的基因分别与质粒pET32a在T4DNA连接酶作用下相连接,转化E.coliDH5a感受态细菌,用含氨苄青霉素的LB培养基平板筛选转化菌,阳性重组子DNA序列测定鉴定。结果:反转录聚合酶链反应法扩增产物经凝胶电泳得到均约...

• 单位
  四川省人民医院; 四川大学; 四川大学华西医院