BRAF激活的长链非编码RNA在结直肠癌中的表达及功能

作者：郭勤浩; 赵岩; 陈洁静; 胡俊; 汪舒伟; 张冬生; 孙跃明

来源：中华消化外科杂志, 2014, 13(05): 376-380.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-9752.2014.05.011

• 结肠肿瘤
• 直肠肿瘤
• 长链非编码RNA
• HCT116细胞
• 迁移

目的探讨BRAF激活的长链非编码RNA(BANCR)在结直肠癌中的表达,以及对结直肠癌HCT116细胞生物学功能的影响。方法收集2012年3月至2013年6月南京医科大学第一附属医院56例结直肠癌手术切除标本(包括癌组织和癌旁组织),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测56例标本中BANCR的表达情况(BANCR高表达组28例、BANCR低表达组28例),并分析其表达水平与临床病理因素的关系;用慢病毒介导shRNA-1和shRNA-2分别干扰HCT116细胞BANCR表达后,将HCT116细胞分为4组:干扰组1(转染慢病毒载体携带LV-shRNA-1)、干扰组2(转染慢病毒载体携带LV-shRNA-2)、阴性对照组(转染无意义序列的重组慢病毒载体)和空白组(仅以RPMI 1640培养基培养),分别采用CCK-8法、流式细胞法和Transwell法检测各组细胞增殖、凋亡和迁移的能力。计量资料以x±s表示,两组间比较采用u检验,多组间均数比较采用单因素方差分析和重复测量的方差分析,两两比较采用LSD-t检验,多因素分析采用二元Logistic回归模型,分类资料采用X2检验。结果 qRT-PCR检测结果显示:56例结直肠癌组织中BANCR相对表达量为1.6±0.4,高于癌旁组织的0.9±0.7,两者比较,差异有统计学意义(u=1 020.000,P<0.05)。单因素分析结果显示:BANCR的高表达与淋巴结转移、肿瘤分期相关(x2=4.595,7.487,P<0.05)。多因素分析结果显示:淋巴结转移和肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ期是影响BANCR高表达的独立危险因素(OR=4.000,5.914,95%可信区间:1.23012.900,1.68520.760,P<0.05)。qRT-PCR检测结果显示:干扰组1、干扰组2、阴性对照组、空白组细胞中BANCR相对表达量分别为0.25±0.04、0.20±0.06、0.96±0.04、0.98±0.03,4组比较,差异有统计学意义(F=271.610,P<0.05)。CCK-8法检测结果显示:各组细胞培养至第6天,干扰组1、干扰组2、阴性对照组的细胞增殖率分别为80.6%±7.6%、81.2%±5.1%、87.9%±13.6%,3组比较,差异无统计学意义(F=0.559,P>0.05)。流式细胞仪检测各组细胞凋亡结果显示:干扰组1、干扰组2、阴性对照组、空白组的细胞凋亡率分别为4.7%±1.7%、5.1%±1.1%、3.1%±0.6%、2.8%±0.9%,4组比较,差异无统计学意义(F=2.881,P>0.05)。Transwell法检测结果显示:干扰组1、干扰组2、阴性对照组、空白组的穿膜细胞数为(135±29)个、(107±18)个、(240±24)个、(245±22)个,4组比较,差异有统计学意义(F=45.194,P<0.05)。结论 BANCR在结直肠癌组织中高表达,其高表达与淋巴结转移和肿瘤分期相关。BANCR能促进HCT116细胞迁移,可能成为结直肠癌诊断和判断预后的重要分子标志物。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院