摘要
目的观察不同透析龄的腹膜透析(peritoneal dialysis, PD)患者腹膜组织中腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells, HPMCs)及血管内皮细胞表达钠-葡萄糖协同转运蛋白(Na+-dependent glucose transporter, SGLT)的差异, 以及研究高糖处理对原代HPMCs内SGLT1、SGLT2蛋白表达的影响。方法根据透析龄将PD患者分为4组:0年组、>0~2年组、>2~4年组和>4年组。采用HE及Masson染色观察PD患者腹膜组织形态学变化, 免疫组化检测腹膜HPMCs及血管内皮细胞SGLT1、SGLT2的表达。从腹透液中提取并培养原代HPMCs, 高糖、高渗培养液处理HPMCs 0 h、12 h、24 h、48 h、72 h及96 h, 采用Western印迹法检测HPMCs的SGLT1、SGLT2蛋白含量, 采用CCK-8试剂盒检测细胞活力。结果 HE及Masson染色显示, 0年组PD患者壁层腹膜光滑连续, 可见一层扁平HPMCs;>0~2年组PD患者HPMCs较0年组减少;>2~4年组PD患者HPMCs体积增大, 数量减少;>4年组PD患者腹膜明显增厚、纤维化明显, HPMCs几乎不可见。免疫组化显示, 随着透析龄增加, HPMCs内SGLT1、SGLT2蛋白表达逐渐下降(P<0.05);腹膜上血管壁增厚, 但不同透析龄患者腹膜血管内皮细胞SGLT1、SGLT2表达差异无统计学意义(P>0.05)。用60 mmol/L葡萄糖处理原代HPMCs, 可以先上调(0 h、12 h、24 h), 后下调(24 h、48 h、72 h、96 h)SGLT1的表达(P=0.029);高糖处理对原代HPMCs中SGLT2的表达无明显影响。结论高糖和透析龄的增加可导致HPMCs数量减少, 活力下降, SGLT1、SGLT2表达下降, 但对腹膜血管内皮细胞SGLT1、SGLT2的表达无明显影响。
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单位复旦大学附属中山医院