人凝血因子IX的线性B细胞表位预测及鉴定

作者：杜进; 陈磊; 仲从浩; 程超; 祝先潮; 李荣秀

来源：安徽师范大学学报(自然科学版), 2014, 37(06): 569-580.

DOI：10.14182/j.cnki.1001-2443.2014.06.013

• FIX
• B表位预测
• B表位移植
• B表位鉴定

为预测并鉴定人凝血因子IX(FIX)的线性B细胞表位.通过IEDB数据库及Discovery Studio软件预测FIX的B表位和白喉毒素T结构域(DTT)的B表位,用所预测的FIX的B表位替换某预测的DTT的B表位形成DTT-表位融合蛋白.通过基因工程技术制备各重组蛋白,并免疫小鼠,通过ELISA和Western-blot检测抗血清效价和特异性,通过等温量热滴定技术(ITC)测定抗体的亲和力.预测到4个FIX的B表位.用重组蛋白FIX-2-DTT免疫的小鼠产生了识别完整FIX的抗体,该抗体具有良好的特异性,其结合常数KD为106 M-1.表明FIX-2(306 NAAINKY312)是FIX的B表位,用重组蛋白FIX-2-DTT免疫小鼠能够产生特异性识别FIX且亲和力温和的抗体.

• 单位
  微生物代谢国家重点实验室; 上海交通大学; 生命科学技术学院