乌骨藤总苷对肺腺癌NCI-H1299细胞糖酵解、凋亡和自噬作用的影响

作者：王晨亮; 张菁; 刘浩茹; 李观华^*

来源：中国当代医药, 2022, 29(27): 15-19+24.

• 乌骨藤总苷
• Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物
• 糖酵解
• 凋亡和自噬
• 肺腺癌细胞

目的 探讨乌骨藤总苷通过Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物（KRAS）对肺腺癌细胞糖酵解、凋亡和自噬的影响。方法 体外培养NCI-H1299细胞，分为对照组、乌骨藤总苷低剂量组、乌骨藤总苷高剂量组、乌骨藤总苷+Vector组和乌骨藤总苷+KRAS组。对照组用正常培养基作用于细胞，乌骨藤低剂量组用终浓度为5 mg/ml的乌骨藤总苷作用于细胞，乌骨藤高剂量组用终浓度为20 mg/ml的乌骨藤总苷作用于细胞，乌骨藤总苷+Vector组先在细胞内转染入阴性对照载体，再用20 mg/ml的乌骨藤总苷作用于细胞，乌骨藤总苷+KRAS组转染入KRAS过表达载体后，用20 mg/ml的乌骨藤总苷作用于细胞。用qRT-PCR法检测各组细胞中KRAS mRNA的表达情况，用Western blot法检测各组细胞中KRAS蛋白的表达情况，用MTT法检测细胞增殖抑制率，用试剂盒检测各组细胞葡萄糖消耗量和乳酸含量，用流式细胞术检测细胞凋亡率，用Western blot法检测各组细胞中凋亡和自噬相关蛋白的表达水平。结果 乌骨藤总苷低剂量组和乌骨藤总苷高剂量组KRAS表达水平、葡萄糖消耗量、乳酸含量、Bcl-2蛋白水平低于对照组，细胞增殖抑制率和凋亡率、LC3-Ⅱ/Ⅰ、beclin-1蛋白和Bax蛋白水平高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。乌骨藤总苷+KRAS组细胞中KRAS水平、葡萄糖消耗量和乳酸含量、Bcl-2蛋白表达水平均高于乌骨藤总苷+Vector组，差异有统计学意义（P<0.05）。乌骨藤总苷+KRAS组细胞增殖抑制、细胞凋亡率、LC3-Ⅱ/Ⅰ、Bax蛋白和beclin-1蛋白水平低于乌骨藤总苷+Vector组，差异有统计学意义（P<0.05）。乌骨藤总苷高剂量组和乌骨藤总苷+Vector的各项指标比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 乌骨藤总苷可以通过抑制KRAS的表达，抑制肺腺癌细胞的糖酵解过程，促进肺腺癌细胞凋亡和自噬，从而对肺腺癌细胞起到抑制作用。

• 单位
  江西省九江市第一人民医院