miR-198通过靶向ZEB2调控EMT过程抑制肝癌细胞增殖和迁移的机制研究

作者：陈偲; 李忠辉; 王颖^*

来源：现代检验医学杂志, 2022, 37(04): 23-29.

• 肝细胞癌
• 微小核糖核酸-198
• E盒结合锌指蛋白2 (ZEB2)
• 增殖
• 迁移
• 上皮间质转化

目的 探讨微小核糖核酸-198(miR-198)在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）组织细胞中的表达及其对癌细胞增殖、迁移的影响及其相关机制。方法 采用qRT-PCR检测miR-198在HCC组织及细胞(HepG2,Hep3G,MHCC97H,Huh7)中的表达情况；采用脂质体2000向Huh7细胞中单独转染miR-198 mimics，共转染miR-198 mimics和pcDNA3.1-ZEB2；生物信息学网站预测miR-198的潜在靶基因，采用双荧光素酶报告基因实验进行验证；采用Western blot检测E盒结合锌指蛋白2(E-box binding zinc finger protein 2, ZEB2)及上皮-间质转化（epithelialmesenchymal transformation, EMT）相关蛋白表达；CCK-8法和细胞划痕实验检测Huh7细胞增殖和迁移能力。结果20例HCC组织中miR-198相对表达量（0.354±0.022）明显低于邻近正常组织（4.762±1.135），差异有统计学意义（t=17.365,P <0.001）。HCC细胞系HepG2(0.589±0.103),Hep3G(0.495±0.086),MHCC97H(0.558±0.056)和Huh7(0.362±0.045)中miR-198相对表达量较正常肝细胞LO2(1.823±0.125)显著降低（t=17.159,18.466,17.590,20.315，均P <0.05）。miR-198 mimics组细胞增殖（0.398±0.146 vs 0.691±0.213）和迁移能力（20.012±2.103 vs 84.032±6.512）较对照组明显降低（t=1.965,52.459，均P <0.001）。miR-198 mimics组细胞中E-cadherin表达较对照组明显升高，N-cadherin和Vimentin表达较对照组明显降低（t=18.478,17.550,19.706，均P <0.01）。ZEB2是miR-198的靶基因，miR-198负调控ZEB2。20例HCC组织中ZEB2相对表达量（3.621±1.143）明显高于邻近正常组织（0.736±0.030），差异有统计学意义（t=11.284,P <0.001），与miR-198表达呈负相关（r=-0.702,P <0.05）。共转染过表达ZEB2逆转了miR-198 mimics对HCC细胞增殖、迁移和EMT的抑制作用。结论 miR-198在HCC组织和细胞中表达下调，miR-198通过靶向负调控ZEB2的表达抑制Huh7细胞的增殖和迁移。