摘要

目的 观察葛根芩连汤(GQD)对于高糖处理的人脐静脉血内皮细胞(HUVECs)线粒体功能、结构、线粒体动力学相关蛋白的影响,探讨GQD对血管内皮的保护作用及机制。方法 制备GQD含药血清,体外培养HUVECs,高糖诱导HUVECs损伤模型,以CCK8法筛选出最佳给药浓度及时间并将细胞分为对照组、模型组、含药血清组和阳性对照组。以磷钼酸比色法检测HUVECs三磷酸腺苷(ATP)含量,乳酸脱氢酶比色法检测HUVECs乳酸(LD)含量,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定HUVECs葡萄糖(Glu)含量,以流式法检测线粒体膜电位,透射电镜观察线粒体结构,Wstern Blot法检测线粒体融合蛋白Mfn1、Mfn2和分裂蛋白Drp1表达。结果 最佳给药浓度为5%,最佳作用时间为48 h。高糖处理的HUVECs细胞Glu及LD含量增加,ATP含量下降,线粒体膜电位降低,Mfn1、Mfn2表达下降,Drp1表达增加(P<0.05)膜结构被破坏。与模型组相比,GQD含药血清组及阳性对照组HUVECs Glu及LD含量下降,ATP含量增加,线粒体膜电位增加,Mfn1、Mfn2表达显著上调,Drp1表达下降(P<0.05)膜结构恢复。结论 GQD含药血清能够改善高糖诱导的HUVECs细胞线粒体结构与功能,其机制可能与GQD能够调节线粒体动力学有关。