尼罗罗非鱼Crtam基因的克隆鉴定与mRNA表达分析

作者：吴凡; 谢彩霞; 汪志文; 夏洪丽; 鲁义善^*; 简纪常

来源：基因组学与应用生物学, 2021, Z1: 1943-1951.

DOI：10.13417/j.gab.040.001943

• 尼罗罗非鱼
• Crtam
• 无乳链球菌
• 克隆
• 表达分析

Crtam作为NK细胞和CD8+T细胞的活化标志物,已被证实在哺乳动物中参与多种免疫途径,但在罗非鱼中的作用未知。本研究克隆鉴定了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) Crtam cDNA全长(命名为On-Crtam),对该基因进行生物信息学分析,并运用荧光定量PCR对无乳链球菌刺激后On-Crtam mRNA在各免疫组织及器官中的表达模式进行了研究。结果显示,On-Crtam基因CDS区为1 335 bp,编码444个氨基酸,理论分子质量为110.15 kD,等电点为5.01。On-Crtam与奥利亚罗非鱼(Oreochromis aureus)相似性最高(98.65%),与鱼类的同源性均在90%以上,表明Crtam在鱼类进化过程中较保守,但与其它物种同源性较低,在不同物种之间可能具有一定差异性。On-Crtam在健康尼罗罗非鱼各组织及器官中均有表达,在肝脏中表达量最高,其次是肌肉,胸腺,在脑中表达量最低。经poly I:C病毒类似物和灭活无乳链球菌刺激后,On-Crtam的表达量在肝脏、头肾和皮肤等免疫组织及器官中都表现为极显著上调。这表明On-Crtam基因可能在无乳链球菌等病原入侵宿主过程中发挥重要作用,但其作用机制尚需进一步研究阐明。

• 单位
  广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室; 广东海洋大学; 广东海洋大学深圳研究院