Wnt3a蛋白影响矿化液诱导牙髓干细胞分化能力的研究

作者：孙艳艳; 袁梦桐; 史欣; 刘明月; 胡伟平

来源：中华口腔医学杂志, 2016, 51(10): 634-639.

• WNT蛋白质类
• 细胞增殖
• 牙髓干细胞
• 成骨向分化

目的研究Wnt3a蛋白对牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)增殖及成骨向分化的影响。方法对培养液和矿化液分别加入不同质量浓度的Wnt3a蛋白(0、5、20、50、100μg/L)作用于DPSC,应用甲基噻唑基四唑法于不同作用时间(1、3、5、7 d)检测DPSC的增殖情况及碱性磷酸酶活性;茜素红染色检测矿化结节形成情况;通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-PCR)法检测骨涎蛋白、Ⅰ型胶原、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX-2)及骨钙蛋白4种骨源性基因的表达情况。结果 5μg/L的Wnt3a蛋白对DPSC的促增殖作用最强;培养7 d后含有5μg几Wnt3a蛋白的矿化液组碱性磷酸酶活性(0.47±0.04)显著强于其他组(矿化液组:0.39±0.05;20μg几组:0.34±0.03;50μg/L组:0.27±0.07;100μg/L组:0.20±0.03);28 d后茜素红染色结果表明该组促进矿化作用最强,产生的矿化结节大小及数量明显多于其他组。7 d后,5μg/L Wnt3a矿化液组骨涎蛋白和Ⅰ型胶原基因阳性表达水平(分别为154.10±23.57和13.74±3.80)均显著高于矿化液组(分别为16.22±6.08和1.38±0.27,P<0.05)。结论适宜浓度的Wnt3a蛋白可以促进DPSC增殖;Wnt3a蛋白与矿化液联合作用于DPSC可以促进其成骨向分化。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第二医院; 徐州市口腔医院