miR-654-3p下调NEK2表达对胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响

作者：周明安; 陶治鹤; 王勇

来源：河北医药, 2020, 42(18): 2725-2729.

• miR-654-3p
• NEK2
• 胶质瘤
• 增殖
• 凋亡

目的研究miR-654-3p对胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响及潜在的作用机制。方法设置胶质瘤细胞U251组、U373组,正常人星形胶质细胞NHA组;miR-NC组(转染miR-NC)、miR-654-3p组(转染miR-654-3p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-654-3p组)、si-NC组(转染si-NC)、si-NEK2组(转染si-NEK2)、miR-654-3p+pcDNA3.1组(共转染miR-654-3p和pcDNA3.1)、miR-654-3p+pcDNA3.1-NEK2组(共转染miR-654-3p和pcDNA3.1-NEK2)用脂质体法转染至胶质瘤细胞中。qRT-PCR检测miR-654-3p和NEK2 mRNA的表达水平;采用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western Blot检测NEK2蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果胶质瘤U251、U373细胞与正常胶质NHA细胞相比,miR-654-3p的表达水平显著下降(P<0.05)。过表达miR-654-3p后miR-654-3p的表达水平显著升高;胶质瘤细胞U251、U373细胞活性显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05)。miR-654-3p可靶向调控NEK2。抑制NEK2表达,NEK2 mRNA和蛋白的表达水平显著降低;胶质瘤细胞U251活性显著降低、凋亡率显著升高(P<0.05)。过表达NEK2,与miR-654-3p+pcDNA3.1组相比,miR-654-3p+pcDNA3.1-NEK2组中胶质瘤细胞U251细胞活性显著升高、凋亡率显著降低(P<0.05);过表达NEK2表达可逆转miR-654-3p对胶质瘤细胞U251的增殖抑制和凋亡促进的作用。结论过表达miR-654-3p可以抑制胶质瘤细胞增殖,促进凋亡,其机制可能与靶向下调NEK2有关。可为胶质瘤的诊断和治疗提供新靶点和新思路。