天麻素对高糖条件下RF/6A细胞SIRT1/TLR4信号通路及细胞增殖与凋亡的影响

作者：杨永利^*; 薛峥; 林芳; 杨玉洁

来源：中国中医眼科杂志, 2020, 30(09): 618-623.

DOI：10.13444/j.cnki.zgzyykzz.2020.09.003

• 天麻素
• SIRT1/TLR4
• 高糖诱导
• RF/6A细胞

目的探究天麻素对高糖诱导的RF/6A细胞增殖、迁移、凋亡及SIRT1/TLR4表达水平的影响。方法将RF/6A细胞随机分5组:正常对照组(NC组),正常培养,不做任何处理;高糖对照组(HG组),在高糖环境下诱导、培养;低浓度组(LC组),在高糖环境下培养,并用5μmol/L天麻素预处理;中浓度组(MC组),在高糖环境下培养,并用10μmol/L天麻素预处理;高浓度组(HC组),在高糖环境下培养,并用20μmol/L天麻素预处理。通过CCK-8法、TUNEL法、细胞划痕法、Western blot法、qRT-PCR法等方法分析检测5组细胞增殖情况、迁移能力、凋亡、SIRT1/TLR4的蛋白含量及mRNA的表达含量的差异性。结果 (1)细胞增殖:与NC组比较,HG组细胞OD值降低(t=5.394,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组细胞OD值依次增高(tLC=4.638,tMC=4.938,tHC=8.389,均P=0.000),差异均有统计学意义。(2)细胞凋亡:与NC组比较,HG组细胞凋亡数量升高(t=12.690,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组细胞凋亡数量依次降低(tLC=4.713,tMC=7.588,tHC=10.050,均P=0.000),差异均有统计学意义。(3)细胞迁移:与NC组比较,HG组细胞迁移数量降低(t=23.100,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组细胞迁移数量依次升高(tLC=5.040,tMC=11.280,tHC=15.550,均P=0.000),差异均有统计学意义。(4)SIRT1蛋白含量:与NC组比较,HG组细胞含量降低(t=6.606,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组细胞SIRT1蛋白含量依次升高(tLC=2.195,P=0.043;tMC=3.808,P=0.002;tHC=5.556,P=0.000),差异均有统计学意义。(5)TLR4蛋白含量:与NC组比较,HG组细胞含量升高(t=6.746,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组细胞含量依次降低(tLC=2.141,P=0.048;tMC=4.427,P=0.000;tHC=5.321,P=0.000),差异均有统计学意义。结论高糖条件下可诱导RF/6A细胞凋亡,天麻素能够抑制高糖诱导的RF/6A细胞凋亡,其机制可能与上调SIRT1表达、抑制TLR4信号通路等有关。