摘要
目的探寻与囊型包虫病患者包囊钙化相关的基因,从分子生物学水平提供判断患者预后情况的依据。方法于2013年6月至2014年12月,收集前往宁夏3家医院就诊的32例囊型包虫病患者(10例进行mRNA基因芯片分析,22例进行Real-time PCR分析)和11例肝囊腺瘤患者的肝组织。采用基因表达差异显著性分析方法对10例囊型包虫病患者(钙化组与非钙化组各5例)的基因表达差异进行分析和筛选,用倍数变化衡量同一基因在两组之间表达量的变化情况。采用Real-time PCR在22例囊型包虫病患者(钙化组与非钙化组各11例)之间进行验证,以GAPDH作为内参基因,并用11例肝囊腺瘤患者进行标化,计算钙化组和非钙化组之间半乳糖凝集素4(LGALS4)和酸性神经酰胺酶(ASAH1)的相对表达量,并采用t’检验比较两组的差异。结果经基因表达谱芯片筛选出5个表达有显著性差异的基因,且都在钙化组中表达下调,其中LGALS4和ASAH1下调程度较明显,倍数变化分别为0.008 8和0.020 3。Real-time PCR验证结果显示,LGALS4在钙化组的相对表达量为0.49±0.27,非钙化组为2.70±2.61,差异有统计学意义(t=-2.59,P=0.026);ASAH1在钙化组的相对表达量为1.36±0.33,非钙化组为1.68±0.67,差异无统计学意义(t=-1.44,P=0.167)。在非钙化组中,LGALS4和ASAH1的表达量波动范围较大,且两者表达量变化的趋势呈正相关(r=0.91,P=0.001),即LGALS4表达量较低的患者其ASAH1表达量也相对较低。结论 LGALS4和ASAH1在发生钙化的囊型包虫病患者中低表达,可能成为判断囊型包虫病自愈倾向的标志基因。
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单位基础医学院; 宁夏医科大学; 宁夏医科大学第二附属医院; 菏泽市立医院; 宁夏医科大学总医院; 上海人类基因组研究中心