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摘要
目的优化分离培养高纯度的大鼠肝细胞与枯否细胞,为肝细胞与枯否细胞的共同培养提供实验细胞。方法 1原位胶原酶灌注法分离细胞;2 Percoll液不连续密度梯度离心法分离枯否细胞;3选择性贴壁纯化枯否细胞;4台盼蓝拒染法判定细胞活力,PAS染色法鉴定肝细胞,墨汁吞噬及CD68免疫染色法鉴定枯否细胞。结果通过改良的原位胶原酶灌注法,不连续密度梯度离心法以及选择性贴壁法等手段,成功实现了肝细胞与枯否细胞的同时分离,且所分离出的2种细胞的得率与纯度均达到后续实验所需细胞的要求。结论通过该创新方法同时分离肝细胞与枯否细胞是有效可行的。
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