摘要

海洋放线菌因其所处环境特殊,在生理性状和遗传背景方面都具有独特的性质,因此海洋放线菌具有产生特殊代谢产物的巨大潜力。本研究以西沙海绵为研究对象,挖掘其具有抑菌活性的共附生放线菌资源。首先,利用平板分离法从海绵样品中分离纯化出一株活性放线菌菌株ITBB-ZK-a5;对其进行16S rRNA基因测序,结合构建的系统发育树和菌落形态特征,确定该菌株为链霉菌。其次,采用平板对峙法研究菌株ITBB-ZK-a5对植物病原真菌的抑菌广谱性和持效性,结果表明该菌株对供试的16株病原真菌都有较好的抑菌活性,抑菌谱较广,且对峙14 d、30 d仍具有活性,抑菌持效性较好;为了进一步验证菌株ITBB-ZK-a5平板通过产生活性物质抑制病原菌生长,对菌落边缘的无菌琼脂块进行抑菌活性研究,结果表明抑菌率与菌落距离呈负相关,说明放线菌可能通过向平板中分泌活性物质以抑制病原菌的生长。该菌株连续转接5代后,仍具有较好的世代稳定性。再次,利用大米固体培养基对菌株ITBB-ZK-a5进行发酵,乙酸乙酯萃取浓缩得到提取物,通过滤纸片法对发酵粗提物进行光稳定性和热稳定性研究,结果表明,随着水浴温度升高和紫外照射时间的增加,菌株ITBB-ZK-a5对香蕉炭疽病病原菌的抑制效果呈下降趋势,但仍具有较强的抑菌活性。最后,测定菌株ITBB-ZK-a5对香蕉炭疽病病原菌的半最大效应浓度EC_(50)值为38.88 μg/mL,对木瓜炭疽病病原菌的EC_(50)值为11.70 μg/mL。本研究对南海海绵共附生放线菌进行了分离鉴定,筛选出具有抑制多种热带作物病原真菌活性的生防菌株ITBB-ZK-a5,并对其进行抑菌活性研究,为后续生防菌株的开发利用提供研究基础。