Nar1基因酵母表达载体的构建及表达鉴定

作者：赵炜; 方炳雄; 刘依娜; 牛宇杰; 袁源; 刘新光

来源：湖北医药学院学报, 2014, 33(02): 110-113.

DOI：10.13819/j.issn.1006-9674.2014.02.003

• Nar1
• 酵母
• 表达

目的:构建Nar1基因的酵母表达载体,并纯化His-Nar1融合蛋白,为进一步研究Nar1的相互作用蛋白及其功能奠定基础。方法:通过PCR扩增Nar1全长基因;通过定向克隆的方法将Nar1片段与载体pYES2/NTC连接;通过乙酸锂转化法把重组质粒转化入野生型酵母菌株INVSc1;再通过免疫沉淀的方法纯化His-Nar1融合蛋白;通过Western blot检测靶蛋白。结果:DNA测序验证穿梭表达质粒pYES2/NTC-Nar1构建成功,Western blot检测到融合蛋白His-Nar1的表达。结论:成功构建Nar1酵母过表达载体,并且可以有效表达融合蛋白His-Nar1。

• 单位
  普宁市人民医院; 第二临床医学院; 广东医科大学