摘要

目的 探讨β-磷酸三钙(β-TCP)复合改良型富血小板纤维蛋白(A-PRF)对兔成骨细胞增殖和分化的影响。方法 选取新西兰乳兔取颅顶骨制备成骨细胞,成年雄性新西兰大白兔取耳中央动脉血制备兔A-PRF。实验分为4组:A-PRF(A-PRF组)、β-TCP(β-TCP组)及β-TCP+A-PRF复合物(复合组)分别与成骨细胞共培养,空白组无材料仅培养成骨细胞。扫描电镜观察成骨细胞在不同材料上的形态结构,黏附、生长及增殖情况;细胞计数试剂盒8(CCK-8)定量分析4组成骨细胞增殖情况;ELISA检测Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)分泌情况;茜素红染色检测矿化结节的形成情况。结果 成骨细胞与材料复合培养后,电镜下见细胞在β-TCP表面和内部空隙中,以及A-PRF材料表面生长增殖。CCK-8结果显示,β-TCP组培养前5 d,细胞生长增殖受到抑制,其余3组细胞未见明显异常;随培养时间延长细胞增殖明显,培养过程中复合组和A-PRF组细胞数量明显高于β-TCP组(P<0.05)。成骨相关蛋白检测结果显示:Col-Ⅰ、ALP和OCN的分泌均随时间延长而增加,同一时间点Col-Ⅰ、ALP、OCN分泌量β-TCP组最高,复合组和A-PRF组次之,空白组最低(P<0.05)。培养4周后检测矿化结节,复合组生成最多,β-TCP组和A-PRF组次之,空白组最低(P<0.05)。结论 β-TCP和A-PRF复合物对成骨细胞增殖具有明显促进作用,且能有效促进其成骨相关蛋白分泌和矿化结节的沉积,具有良好的体外成骨效应,是理想的骨移植材料。