酵母双杂交筛选TEB4相互作用蛋白

作者：姜璎慈; 李艳娜; 李学礼; 吕立夏; 李静琪; 李姣; 徐磊

来源：中国现代医学杂志, 2010, (13): 1986-1988+1993.

• 酵母双杂交
• TEB4
• ATP-C6
• 帕金森病 yeast two-hybride
• TEB4
• ATP-C6
• PD

目的酵母双杂交筛选与TEB4(MARCH-Ⅵ)有相互作用的蛋白,构建该蛋白基因序列的重组载体。方法以人TEB4为诱饵质粒,利用酵母双杂交技术筛选人淋巴瘤cDNA文库。在SD/-4培养基上共获得150多个阳性克隆,将酵母菌扩增后抽提质粒,转化大肠杆菌,进行序列分析,并经过回复杂交验证,发现了一个与TEB4相互作用的蛋白:ATP synthase F0 subunit6(ATP-C6)。PCR法扩增ATP-C6,亚克隆到质粒pCMV-HA中,获得重组质粒pCMV-HA-ATP-C6,酶切和测序进行鉴定。结果从人淋巴瘤cDNA文库筛选到一个与TEB4有相互作用的蛋白ATP-C6,并成功构建重组质粒p...

• 单位
  上海市长宁区疾病预防控制中心; 同济大学