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摘要
利用生物信息学技术对蛹虫草(Cordyceps militaris)的基因组数据进行挖掘,找到潜在的纤溶酶编码基因CmFbk2,该基因全长为1810 bp、编码531个氨基酸,序列分析显示该蛋白为典型的嗜热菌蛋白酶。利用基因敲除技术获得突变菌株,分别对野生型菌株、突变菌株和回补菌株的表型进行观察,结果表明:突变菌株的产孢量下降,孢子萌发率和菌丝生长速度不受影响;进一步的表型分析显示,突变菌株在米饭培养基上只生长菌丝,不能形成正常形态的子实体,其回补菌株可以产生正常形态子实体;检测野生型菌株和突变菌株菌丝体、发酵液中的纤溶酶活性,与野生型菌株相比,突变菌株中的纤溶酶活性明显下降,回补菌株中的纤溶酶活性减少50%。
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