Hela细胞蛋白质分离和肽质量指纹谱鉴定方法的建立

作者：胡家; 李燕英; 孙丽翠; 殷爱红; 武文琦; 贺俊崎

来源：首都医科大学学报, 2009, 30(03): 331-335.

DOI：10.3969/j.issn.1006-7795.2009.03.016

• Hela细胞
• 蛋白质组
• 2-DE
• MALDIO-TOF-MS
• 肽质量指纹图谱

目的研究Hela细胞总蛋白质的分离及利用肽质量指纹谱对蛋白质进行鉴定的方法。方法提取了Hela细胞的总蛋白质,通过双向电泳技术对蛋白质进行了分离,并应用图像扫描仪及图像分析软件获取蛋白质点的数字化信息。对其中不同丰度的蛋白质点,进行胶内酶切后,通过基质辅助激光解吸/电离直角型飞行时间质谱(MALDIO-TOF-MS)分析,再将检测出的多肽质量数通过Mascot搜索引擎检索NCBInr数据库。结果获得了Hela细胞总蛋白质双向电泳图谱及蛋白质点的数字化信息,通过MALDIO-TOF-MS检测得到的肽质量指纹谱再经过网上公共数据的检索从而获得3个蛋白质点分别是α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)、γ-肌动蛋白(γ-actin)和过氧化物酶2(peroxiredoxin 2)。结论Hela细胞总蛋白质双向电泳的分离效果较好,肽质量指纹谱法能有效地对Hela细胞的蛋白质斑点进行鉴定。

• 单位
  首都医科大学; 北京理工大学