摘要

目的:采用Box-Behnken设计-响应面法优化加味塔布森-2水提工艺,并对其体外药效进行考察。方法:采用响应面法,以咖啡酸、京尼平苷酸2种成分的质量分数为综合得分,优选出浸泡时间、料液比、提取时间和提取次数的最佳值。将最优工艺下提取物与核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand, RANKL)诱导的RAW264.7细胞共培养5 d,随后以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,显微镜下观察TRAP(mL·g-1)阳性细胞状态,评价提取物的体外药效。结果:选取提取时间、浸泡时间以及料液比为考察因素,以咖啡酸和京尼平苷酸含量的综合评分为评价指标,经响应面法优化,得到的最佳提取条件:浸泡时间为540 min,料液比为1∶12(g·mL-1),提取时间为44 min,提取次数为2次。此条件下所得的提取物对RANKL诱导的RAW264.7细胞有明显抑制作用,可减少TRAP阳性细胞,并抑制多核生成。结论:运用响应面分析法优选的加味塔布森-2水提工艺重复性好、稳定可行,且具有良好的体外药效活性,为后期体内药效实验研究奠定可靠的基础。