药桑椹多糖组成分析及诱导肿瘤细胞凋亡研究

作者：余婉莎; 陈虎; 陈果; 向仲怀; 何宁佳

来源：营养学报, 2017, 39(03): 287-293.

DOI：10.13325/j.cnki.acta.nutr.sin.2017.03.013

• 药桑椹
• 多糖
• 超高效液相色谱
• 细胞凋亡
• 抗肿瘤

目的分离鉴定药桑椹多糖(polysaccharide of black mulberry fruits,PBMF)及其单糖组成,并考察其抗氧化活性以及对He La细胞增殖和凋亡的影响,为药桑椹多糖的抗肿瘤研究及开发利用提供一定的理论依据。方法利用超高效液相色谱法(UPLC)分析药桑椹多糖的单糖组分;体外抗氧化实验观察PBMF的还原力、清除羟自由基能力;MTT法检测细胞增殖活性;倒置显微镜观察细胞形态变化;Annexin V-FITC/PI双染荧光显微镜观察He La细胞凋亡和坏死情况;流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;Western blot检测非活化态半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(procaspase-3)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)表达量。结果 PBMF单糖组成主要为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖,相对摩尔比分别为3.3:1.1:0.29:37.2:0.76:39.7:0.2。PBMF具有较强还原力和羟自由基清除能力。PBMF对He La细胞的增殖具有显著地抑制作用,且呈剂量依赖性。PBMF诱导He La细胞周期停滞于G0/G1期(P<0.05)。上调caspase-3的相对表达量,诱导细胞早期凋亡和晚期凋亡。结论 PBMF能抑制人宫颈癌He La细胞增殖,并诱导细胞凋亡,其机制与caspase-3的活化有关。

• 单位
  西南大学; 家蚕基因组生物学国家重点实验室