摘要
目的通过沉默Rab18的方法探讨Rab18对人胶质瘤U87细胞增殖和凋亡的影响机制,进而初步验证Rab18表达水平在人胶质瘤诊断和进展的价值。方法将不转染的U87细胞作为空白对照组,转染NC siRNA和Rab18 siRNA的U87细胞分别作为阴性对照组和实验组;经手术切除获取瘤旁正常脑组织15例(n=15)和人胶质瘤组织33例(n=33),所有患者术前未曾接受放化疗。分别采用qRT-PCR和Western blot检测Rab18和凋亡相关蛋白mRNA及蛋白的表达;CCK-8实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;HE染色后观察组织形态学。结果 (1)沉默Rab18后人胶质瘤U87细胞Rab18 mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.01),不仅能使G0/G1期细胞显著增加伴随S期细胞显著减少(P<0.01),还能显著上调凋亡相关蛋白P53、Caspase 7、Bax及Bim mRNA和蛋白表达水平(P<0.01);(2)Rab18在人胶质瘤组织中mRNA和蛋白的表达水平显著高于瘤旁正常脑组织(P<0.01),且高级别胶质瘤(WHOⅢ~Ⅳ,n=19)Rab18 mRNA和蛋白的表达水平显著高于低级别胶质瘤(WHOⅠ~Ⅱ,n=14)(P<0.01)。结论沉默Rab18不仅能抑制人胶质瘤细胞增殖,还能诱导其凋亡。且Rab18的表达水平与恶性程度有关。Rab18可作为人胶质瘤一个潜在的临床诊断和进展的分子标志物。
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单位第一临床医学院; 南方医科大学