补肾调经方通过有氧糖酵解促进控制性超促排卵小鼠囊胚发育的实验研究

作者：刘孟瑞; 于志芳; 左茜茜; 郝延芝; 张玉倩; 杜惠兰^*

来源：中国中西医结合杂志, 2022, 42(05): 575-581.

• 补肾调经方
• 囊胚
• 有氧糖酵解

目的 观察补肾调经方对囊胚质量的影响及与有氧糖酵解相关基因表达的关系。方法 将100只动情周期正常的费城癌症研究所(ICR)雌性小鼠按照随机数字表法分为4组，分别为正常组、模型组、补肾低剂量组、补肾高剂量组，每组25只。除正常组，其余各组小鼠建立控制性超促排卵模型。正常组及模型组雌鼠每日上午9:00灌胃蒸馏水，补肾低、高剂量组雌鼠每日上午9:00灌胃补肾调经方低、高剂量(2.6、5.2 g/mL)，连续10日。模型组及补肾低、高剂量组于第11日下午16:00同时腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG)10 IU/只，48 h后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)10 IU/只；正常组于第11日下午16:00腹腔注射生理盐水0.1 mL。连续3个周期，每次间隔4天。模型组及补肾低、高剂量组均在控制性卵巢刺激(COS)第3次腹腔注射HCG后(下午16:00)立即与雄性小鼠合笼。正常组在动情期第3次腹腔注射生理盐水后(下午16:00)立即与雄性小鼠合笼。次日清晨检查阴栓，见栓的雌鼠记为妊娠。妊娠第4天(注射HCG后96 h)在体式显微镜下取出囊胚，观察囊胚质量并计数，计算优质囊胚率；免疫荧光染色、实时荧光定量PCR检测囊胚中的乳酸脱氢酶(LDH)、M2-型丙酮酸激酶(PKM2)、葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G6PDH)、单羧酸转运蛋白4(MCT4)蛋白及mRNA的表达。结果 与正常组比较，模型组的囊胚数量增加(P<0.05)，优质囊胚率降低(P<0.05)，囊胚G6PDH、PKM2、LDH、MCT4蛋白及m RNA表达均降低(P<0.05)；与模型组比较，补肾低、高剂量组的优质囊胚率升高(P<0.05)，囊胚G6PDH、PKM2、LDH、MCT4蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05)。结论 补肾调经方可增加超促排卵小鼠囊胚数量，提高小鼠囊胚质量，促进胚胎植入，其机制可能与上调有氧糖酵解改善早期胚胎能量代谢有关。

• 单位
  河北中医学院