摘要
目的:该文从多方面进行分析、比较,及时、准确地鉴别广佛手黄龙病,以便于及时确定病害、防控病情。方法:通过性状分析,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),酶切反应及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测多种手段相结合,对广佛手黄龙病进行鉴定。结果:从性状上来看,感病广佛手有典型的叶片斑驳型黄化、果相对较小,甚至畸形的特征,但并没有发现"红鼻子果"现象,这些均可以作为田间初步判别广佛手黄龙病的依据; RT-PCR检测及酶切反应结果表明,引物为OI1/OI2c时,广佛手病株有特异性条带1 160 bp,且能被Xba I酶切成520 bp和640 bp,这与其他被黄龙病侵染的柑橘属植物的检测结果一致; Real-time PCR检测结果显示,被黄龙病侵染的广佛手叶片有扩增曲线和熔解曲线,熔链温度为82℃,且Ct值在24. 6~28. 2,而广佛手正常株没有扩增现象出现。结论:性状分析可以在田间初步判别黄龙病,但是具有一定的主观性,RTPCR及Real-time PCR检测能进一步确定广佛手黄龙病,且q PCR检测更加灵敏,还可以定量。通过性状分析以及分子鉴定的结合,能够更加及时、准确地确定广佛手黄龙病。
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单位国家中医药管理局; 广东药科大学