马鼻肺炎病毒双重PCR分型检测方法的建立

作者：田志革; 侯玉杰; 郭巍; 曲娟娟; 相文华

来源：中国兽医科学, 2011, (09): 907-910.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2011.09.011

• 马鼻肺炎病毒1、4型
• 双重聚合酶链反应
• 分型检测 equine herpesviruses type 1 and 4
• duplex PCR
• detection for distinction

根据GenBank中登录的马鼻肺炎病毒1、4型(EHV1、EHV4)糖蛋白B(gB)基因特异保守序列(登录号分别为AY665713、AF030027.1),各设计1对引物,建立了同时分型检测EHV1、EHV4的双重PCR方法;确定其最佳工作条件,并对该方法进行了特异性和敏感性试验。结果显示,在EHV1、EHV4中分别扩增出265bp和537bp的特异性目的条带,而马流感病毒cDNA、马动脉炎病毒cDNA、马乙型脑炎病毒cDNA及马传染性贫血弱毒疫苗株cDNA均未扩增出任何条带。EHV1的DNA最低检出限为2.1pg,EHV4的最低检出限为15pg。表明本试验建立的方法具备很高的应用价值。

• 单位
  东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 生命科学学院; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所