卡介苗菌株和结核分枝杆菌H37Ra菌株原生质体的制备研究

作者：樊超; 姜晓霞; 张锋; 王霞; 吴芳; 章乐; 吴江东; 张春军; 张辉; 梁晨; 庄睿; 李文娟; 张万江

来源：石河子大学学报(自然科学版), 2014, 32(02): 175-179.

DOI：10.13880/j.cnki.65-1174/n.2014.02.010

• 原生质体制备
• BCG菌株
• 结核分枝杆菌H37Ra菌株
• 影响因素

分别以卡介苗菌株(BCG)及结核分枝杆菌国际标准无毒株H37Ra菌株(H37Ra)为受体菌,制备上述两种菌株的原生质体,同时通过优化细菌菌龄、酶解浓度、酶解温度以及酶解时间等影响因素,探索出制备原生质体形成及再生的最优条件。结果显示:摸索出制备BCG和H37Ra菌株的原生质体条件:在对数生长期的两亲本菌株,经0.01 mol/L EDTA,0.01%β-巯基乙醇溶液预处理;酶解浓度为12 mg/mL,酶解温度为37℃,酶解时间为5 h,可制备出活性较高的两种菌株的原生质体。由此可知,成功制备了BCG与H37Ra菌株的原生质体,并能在高渗固体培养基上再生。本实验为进一步研究该两种菌株原生质体融合试验奠定了基础。

• 单位
  新疆医科大学第五附属医院; 石河子大学; 阿克苏地区第二人民医院; 石河子大学医学院第一附属医院