电针对阿片类药物耐受大鼠海马G蛋白偶联受体及cAMP、CREB表达的影响

作者：刘春; 于波; 王铁东^*

来源：世界中西医结合杂志, 2023, 18(10): 1982-1988.

DOI：10.13935/j.cnki.sjzx.231013

• 阿片类药物耐受
• 电针
• 机械性痛阈
• G蛋白
• 环-磷酸腺苷
• cAMP反应元件结合蛋白

目的 观察电针对阿片类药物耐受大鼠机械刺激缩足反应阈值(Paw withdrawal mechanical threshold, PWMT))、海马组织G蛋白偶联受体(G Protein-Coupled Receptors, GPCRs)及环磷酸腺苷(cyclic AMP,cAMP)、cAMP反应元件结合蛋白(cyclic-AMP response binding protein, CREB)表达的影响，探索G蛋白-谷氨酸受体-cAMP通路是否为电针治疗阿片类药物耐受的可能机制。方法 选取60只SPF级SD大鼠，雌雄各半，按随机数字表法分为生理盐水对照组、药物耐受组、谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+药物耐受组及电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组，每组各12只。通过对药物耐受组、谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+药物耐受组及电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组正常大鼠连续腹腔注射吗啡9 d, 2次/d,制备吗啡耐受(Morphine tolerance, MT)模型，建模成功后，4组继续给予连续7 d腹腔注射吗啡，谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组在予腹腔吗啡注射前0.5 h,予腹腔注射谷氨酸受体抑制剂；电针+药物耐受组在予腹腔吗啡注射后0.5 h,予双侧“合谷”“内关”“三阴交”及“足三里”穴位电针干预，断续波，频率2 Hz, 2次/d,每次干预时间为10 min,连续7 d;电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组给予谷氨酸受体抑制剂和吗啡后，再进行同电针+药物耐受组相同的电针干预。各组分别于造模前、造模第1天、3天、6天、9天和建模成功后第1天、3天、5天、7天检测左足PWMT;采用蛋白质免疫印迹(Western Blot, WB)法检测大鼠海马组织GPCRss、cAMP、CREB蛋白表达，采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆β-内啡肽(β-EP)含量。结果 与生理盐水对照组比较，药物耐受组、谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+药物耐受组及电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组大鼠注射吗啡后第1天、3天、6天PWMT明显升高，差异有统计学意义(P<0.01),但注射吗啡9 d后降低至基础水平，与生理盐水对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05),说明MT模型造模成功；与药物耐受组比较，谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+药物耐受组、电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组大鼠在第3天、5天、7天的PWMT升高，差异有统计学意义(P<0.01);与电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组比较，电针+药物耐受组大鼠在第3天、5天、7天的PWMT明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)。与生理盐水对照组比较，药物耐受组、谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组大鼠海马组织中CREB、cAMP的相对表达均升高，GPCRss的表达相对下降，差异有统计学意义(P<0.01);与药物耐受组比较，谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组、电针+药物耐受组和电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组大鼠海马组织中CREB、cAMP的相对表达均有所下降，差异有统计学意义(P<0.01),电针+药物耐受组大鼠海马组织中GPCRss的表达相对升高，差异有统计学意义(P<0.01);与电针+谷氨酸受体抑制剂+药物耐受组比较，电针+药物耐受组大鼠海马组织中CREB、cAMP的相对表达均降低，GPCRs的表达相对升高，差异有统计学意义(P<0.01)。结论 电针可明显改善MT模型大鼠阿片类药物耐受效应，其机制可能与下调大鼠海马组织中cAMP、CREB蛋白表达，促进β-EP表达，进而减弱G蛋白-谷氨酸受体-cAMP通路上调有关。

• 单位
  辽宁中医药大学附属医院