绵羊肺炎支原体感染对绵羊肺泡巨噬细胞和小鼠巨噬细胞Raw 264.7蛋白质组的影响

作者：张颖; 张凯; 马金成; 李小杰; 马春骥; 高力扬^*

来源：福建农业学报, 2020, 35(11): 1244-1251.

DOI：10.19303/j.issn.1008-0384.2020.11.010

• 绵羊肺炎支原体
• 绵羊肺泡巨噬细胞
• Raw 264.7细胞
• 细胞模型

【目的】评估小鼠巨噬细胞系Raw 264.7替代绵羊肺泡巨噬细胞用于研究绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae, Mo)致病机制的可行性。【方法】从绵羊肺脏灌洗液中分离绵羊原代肺泡巨噬细胞,以绵羊原代肺泡巨噬细胞和小鼠巨噬细胞Raw 264.7细胞系为细胞模型,使用绵羊肺炎支原体Y98标准株分别感染(MOI=10)绵羊原代肺泡巨噬细胞和小鼠巨噬细胞Raw 264.7细胞系24 h后,通过蛋白质组学或定时荧光定量PCR检测Mo刺激后两种细胞中部分蛋白或基因的相对表达量。【结果】从肺中成功分离出绵羊原代肺泡巨噬细胞,经免疫荧光鉴定显示其带有巨噬细胞特异性表面抗原CD14;经Mo感染后,绵羊原代肺泡巨噬细胞和小鼠巨噬细胞Raw 264.7中FADD、IL-1β、NOS2及THBS1等基因的表达均发生显著变化,主要涉及Toll样受体信号通路、MAPK信号通路、自噬作用等生物过程且两种细胞各基因的相对表达变化趋势基本一致。【结论】本研究初步表明选用小鼠巨噬细胞Raw 264.7细胞系替代绵羊原代巨噬细胞进行与Mo的互作研究具有一定的可行性,可为简化Mo致病机制研究模型提供理论基础。

• 单位
  宁夏大学; 宁夏大学新华学院; 生命科学学院