摘要

目的 利用结肠炎小鼠模型,探讨UBE2W对结肠炎粘膜细胞增殖的作用。方法 利用2.5%葡聚糖硫酸钠盐(DSS)喂养C57BL/6小鼠构建结肠炎小鼠模型,采用聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测小鼠结肠组织UBE2W的表达水平。将结肠炎小鼠随机进行尾静脉注射腺病毒(AAV2/9 myc-UBE2W或AAV2/9 Control),分为UBE2W过表达组和对照组,5只/组。观察小鼠的体质量变化,实验结束时取结肠组织行病理HE染色及组织学评分,评价小鼠结肠炎症的严重程度。采用免疫组织化学方法检测两组小鼠结肠粘膜细胞的增殖指标Ki67和BrdU表达水平。在293T和HCT116细胞中,采用CCK-8试剂盒检测过表达UBE2W对细胞增殖的影响。结果 成功建立由DSS诱导的实验性结肠炎小鼠模型,UBE2W在结肠组织中mRNA和蛋白水平与正常小鼠比较明显降低;UBE2W过表达组结肠炎小鼠体质量丢失少于对照组,在第9天和第10天差异最明显(P<0.05),其病理组织学结肠炎症指数低于对照组(P<0.05);UBE2W过表达组小鼠结肠组织细胞中Ki67和BrdU表达水平高于对照组(P<0.05)。在293T中过表达UBE2W后细胞培养72、96 h时的吸光度A450nm均高于对照组(P<0.05),HCT116细胞呈现类似结果。结论 UBE2W对小鼠结肠炎有保护作用,过表达UBE2W有利于结肠炎症的恢复,可能是通过促进结肠细胞增殖实现的。

  • 单位
    解放军总医院