环状RNABANP调控微小RNA-496对前列腺癌细胞生物学行为的影响

作者：王天恩; 李建; 李东升; 王智勇; 杨彦峰

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(05).

• 前列腺癌
• circBANP
• 微小RNA-496
• 细胞恶性表型

目的探讨环状RNA(circRNA)BANP对前列腺癌细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测circBANP、miR-496的表达量;体外培养人前列腺癌细胞DU145, 并敲低细胞中circBANP或miR-496的表达;双荧光素酶报告实验检测circBANP与miR-496的靶向关系;功能实验分析细胞表型变化;蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白表达量;计量资料以均数±标准差(±s)表示, 比较采用独立样本t检验, 以及单因素方差分析。结果 circBANP和miR-496在癌旁组织中的表达量分别是0.96±0.19和1.02±0.17, 在前列腺癌组织中的表达分别是3.10±0.39和0.50±0.13, 且差异有统计学意义(t=35.228、17.352, P<0.05)。CircBANP和miR-496在si-NC组中的表达分别是1.00±0.00以及1.00±0.00, 在si-circBANP组中的表达分别是0.26±0.03和3.41±0.10, 且差异有统计学意义(t=74.000、72.300, P<0.05)。circBANP能够负向调控miR-496的表达。相对于si-NC组和miR-NC组, si-circBANP组和miR-496组中克隆形成数减少, 细胞增殖抑制率升高;相对于si-circBANP+抗miR-NC组, si-circBANP+抗miR-496组中克隆形成数增加, 细胞增殖抑制率降低;且差异有统计学意义(F=268.325、1535.056, P<0.05)。当分别与si-NC组和miR-NC组比较时, si-circBANP组和miR-496组中细胞凋亡率和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)蛋白水平升高, B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白水平降低;与si-circBANP+抗miR-NC组比较, 细胞凋亡率、bax和bcl-2表达在si-circBANP+抗miR-496组中有相反趋势;且差异有统计学意义(F=420.149、397.476、255.709, P<0.05)。当分别与si-NC组和miR-NC组比较时, si-circBANP组和miR-496组中划痕愈合率降低, 迁移细胞数减少;与si-circBANP+抗miR-NC组比较, 划痕愈合率和迁移细胞数在si-circBANP+抗miR-496组中有相反趋势;且差异有统计学意义(F=322.543、490.268, P<0.05)。结论沉默circBANP可通过靶向调控miR-496表达而减弱前列腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移能力及诱导细胞凋亡。

• 单位
  郑州大学第一附属医院