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摘要
以锁阳为原料，采用水提醇沉法得锁阳粗多糖；比较Sevage法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶法、酶法-Sevage法脱蛋白的效果，筛选出锁阳粗多糖最佳脱蛋白方法；通过单因素实验、响应面法优化脱蛋白工艺并考察锁阳多糖的体外免疫活性。结果表明，锁阳粗多糖的最佳脱蛋白方法为酶法-Sevage法；经响应面优化，最佳脱蛋白工艺为酶浓度500 U/mL、酶解温度65 ℃、酶解时间120 min，在此基础上再用Sevage试剂进行1次脱蛋白，蛋白脱除率和多糖保留率分别为70.34%±1.41%和60.09%±1.37%；25 μg/mL锁阳多糖可显著增加脾淋巴细胞IL-6分泌量（P<0.05），50～400 μg/mL锁阳多糖可显著增加脾淋巴细胞分泌IL-6分泌量（P<0.01），25～400 μg/mL锁阳多糖可显著增加脾淋巴细胞TNF-α分泌量（P<0.01）。本研究表明酶法-Sevage法可有效去除锁阳粗多糖中的蛋白质，锁阳多糖具有一定的免疫调节活性。
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