antimiR-138修饰骨髓基质干细胞膜片的可行性及其促进同种冻干骨粉成骨的研究

作者：闫钧; 赵彦涛; 张京; 吴琛; 陈静园; 张玉梅

来源：中国骨与关节杂志, 2015, 4(11): 856-863.

• 间质干细胞
• 转染
• Micro RNAs
• 移植,同种
• 骨生成
• 细胞膜片

目的探索采用非病毒方法转染骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSC)膜片的可行性;antimi R-138转染的BMSC膜片促进同种冻干骨粉(FDB)成骨的可行性。方法采用Vc连续诱导法培养BMSC膜片,通过调整Lipofectamine 2000-mi RNAs载体复合物的用量及转染步骤对BMSC膜片进行转染;采用荧光体式及显微观察、mi RNA-PCR方法比较各组的转染效率的差异;通过大体观察、HE染色和扫描电镜观察BMSC膜片的形态。将BMSC膜片/FDB复合物移植到裸鼠皮下,术后48周,分别采用HE和MT染色对膜片的成骨能力进行评估。结果荧光体式及显微结果表明antimi R-138可成功地转至BMSC膜片中,其中150 n M组对内源性mi R-138的抑制率为85%;体内异位成骨实验表明antimi R-138转染的BMSC膜片可显著促进并加速移植复合物的骨组织形成。结论 (1)通过对以Lipofectamine 2000为载体的转染复合物的用量及转染步骤进行优化,可以构建出具有较高转染效率,良好的细胞相容性以及结构完整的antimi R-138修饰的BMSC膜片。(2)antimi R-138转染的BMSC膜片可显著促进并加速移植复合物的异位骨组织形成。

• 单位
  中国人民解放军火箭军工程大学; 第四军医大学