鼠源性病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及验证

作者：王吉; 王莎莎; 李威; 付瑞; 谭淑萍; 范婷婷; 郑立群; 刘志坚; 汤华东; 万滔; 岳秉飞^*

来源：中国生物制品学杂志, 2023, 36(11): 1361-1372.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.004036

• 鼠源性病毒
• 荧光定量PCR法
• 方法验证

目的 建立8种鼠源性病毒的实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,Q-PCR)检测方法，并进行验证。方法 通过4个实验室验证Q-PCR法的特异性、灵敏度及精密性，同时进行病毒模拟污染试验及盲样检测，并将检测结果进行比对。采用Q-PCR法检测26批SARS-CoV-2疫苗生产用单抗细胞株及15批其他鼠源性制品。结果 用于8种鼠源病毒检测的Q-PCR法与同科同属或其他鼠源病毒无交叉反应；除实验室2对鼠痘病毒(又名脱脚病病毒)(ectromelia virus,EctV/Mouse Pox,MPV)检测的灵敏度为2×102copies/μL外，实验室2对其他7种病毒及其他3个实验室对8种鼠源性病毒的检测灵敏度均为2×101copies/μL；除实验室3对鼠腺病毒(mouse adenovirus,MAdV)检测拷贝数试验间CV为37.58%外，实验室3对其他7种病毒和其他3个实验室对8种病毒检测的试验内、试验间Ct和拷贝数CV均<25%。病毒模拟污染试验检测灵敏度均符合参数要求；4个实验室盲样检测结果符合率为100%。26批SARS-CoV-2疫苗生产用单抗细胞株及15批其他鼠源性制品8种鼠源病毒检测结果均为阴性。结论 鼠源性病毒的Q-PCR法具有良好的特异性、灵敏度及精密性，可用于鼠源性生物制品的检测。

• 单位
  未名生物医药有限公司; 中国食品药品检定研究院; 武汉海特生物制药股份有限公司; 舒泰神(北京)生物制药股份有限公司; 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司