人、牛和羊叠朊基因的表达及牛叠朊蛋白抗血清的制备

作者：刘永生; 唐江山; 路伟; 陈豪泰; 孙德惠; 才学鹏; 张杰

来源：中国农业大学学报, 2008, (03): 14-18.

• 传染性海绵状脑病
• 叠朊
• 朊蛋白
• 基因表达
• 抗血清 transmissible spongiform encephalopathy(TSE)
• doppel(Dpl)
• prion protein(PrP)
• gene expression
• antisera

叠朊(Dpl)是朊蛋白(PrP)的横向同源物,两者的功能密切相关。本研究旨在制备能够特异检测重组表达的或者动物组织中Dpl的抗血清,以用于研究Dpl的功能及其与PrP的关系。根据已克隆的汉族人、中国黄牛、甘肃土种羊的Dpl基因,将其Dpl成熟蛋白编码区分别定向克隆到表达载体pET-30a(+)上,将重组表达载体转入E.coliBL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。将表达并纯化的牛重组Dpl免疫4只青紫蓝兔,制备牛Dpl的抗血清,SDS-PAGE分析表明人、牛和羊的重组Dpl在E.coli中获得了高效表达。用Ni-NTA树脂亲和层析和胶洗脱法纯化了上述表达产物,ELISA和West-b...

• 单位
  中国农业科学院; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室