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摘要
目的观察重组人Ⅲ型胶原蛋白水凝胶用于治疗猪全层皮肤缺损创面,在创面愈合和血管新生,新生真皮胶原排列状态和胶原比例等方面的影响。方法将重组人Ⅲ型胶原蛋白粉末与海藻酸钠粉末以质量比10∶1混合,溶于无菌磷酸盐缓冲液中,制备成胶原蛋白含量为10%的溶液,使用时以10%Ca2+溶液交联成凝胶状。以巴马小型猪作为实验动物制备动物模型,在每头猪背部正中线两侧旁开2 cm分别用手术刀制备3个边长5 cm深达肌肉筋膜的正方形全层皮肤缺损创面,采用同体自身对照,实验组用重组人Ⅲ型胶原蛋白水凝胶治疗,水凝胶外层覆盖无菌硅胶膜保湿;阳性对照组用可吸收性敷料治疗;阴性对照组仅用无菌硅胶膜覆盖。术后7、14、21、90 d,进行创面大体观察,并取材行苏木精-伊红染色,光学显微镜下观察创面修复情况、炎症反应,免疫组织化学染色法检测创面CD31的表达并计数新生血管数目,天狼猩红饱和苦味酸染色偏振光观察胶原纤维排列、Ⅲ型胶原蛋白比例。实验数据比较采用单因素方差分析、SNK-q检验或Kruskal Wallis H检验。结果实验组创面肉芽组织平整,颜色鲜红,柔软湿润。光学显微镜下见实验组较阴性对照组组织炎症反应轻微,创面修复早期肉芽组织生长速度快。CD31免疫组织化学染色结果显示,术后7、14、21 d,实验组新生毛细血管数分别为(18. 8±2. 7)、(32. 0±4. 4)、(42. 8±4. 5)个/hpf,而阴性对照组仅分别为(12. 0±3. 0)、(16. 6±2. 3)、(12. 6±4. 1)个/hpf,各个时间点实验组新生毛细血管数均高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P值均小于0. 05)。术后14、21、90 d创面新生真皮组织天狼猩红饱和苦味酸染色结果显示,实验组较阴性对照组胶原纤维排列规整,与阳性对照组相似,而Ⅲ型胶原蛋白比例较阴性和阳性对照组均升高。结论重组人Ⅲ型胶原蛋白水凝胶可促进全层创面愈合和血管新生,促进新生真皮组织胶原纤维有序排列,增加Ⅲ型胶原在新生真皮胶原中所占比例,从而改善创面愈合质量,并有望减轻创面愈合后的瘢痕形成。
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