摘要
目的探究HAI-1基因对前列腺癌LNCaP细胞迁移、侵袭和增殖的调控机制。方法培养前列腺癌LNCaP细胞和MRC-5人成纤维细胞,构建逆转录病毒表达系统,用活性逆转录病毒原液转导MRC-5细胞,用酵母表达系统重组HAI-1和HAI-2,检测HAI抑制HGF的影响和调节癌症转移的潜力。构建在人成纤维细胞系中诱导HAI表达的逆转录病毒表达系统,检测生物活性肝细胞生长因子(HGF)的表达和活性。前列腺癌LNCaP细胞的转移影响。合成了重组HAI蛋白。检测重组HAI的抑制成纤维细胞介导的前列腺癌侵袭。利用核酶转基因研究前列腺癌LNCaP细胞系中消除HAI-1和HAI-2表达对前列腺癌LNCaP细胞的迁移,增殖和侵入的影响。结果对照组平均侵入23.1±3.9的前列腺癌LNCaP细胞。培养的野生型和MRC-5CONTROL成纤维细胞在体系中产生大量活性HGF,与对照相比,前列腺癌LNCaP细胞侵袭水平增加。HGFA抑制剂能单独地够将由成纤维细胞产生的活性HGF水平降低50%。同时工作的HAI-1和HAI-2抑制了75%HGF产生。前列腺癌LNCaP细胞系的HAI-1或HAI-2的损失导致这些细胞中的加速生长。结论前列腺癌LNCaP细胞系中消除HAI-1和HAI-2表达显著增强了这些前列腺癌LNCaP细胞的迁移,增殖和侵入能力。
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