液相蛋白芯片法检测胱抑素C的条件优化与方法学评价

作者：孙超群; 牛江平; 殷继永^*; 霍军生; 孙静; 黄建; 李天童; 刘宇赫; 刘爱玲

来源：卫生研究, 2023, 52(03): 460-464.

DOI：10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2023.03.021

• 液相蛋白芯片
• 胱抑素C
• 条件优化
• 方法学评价

目的 优化液相蛋白芯片检测胱抑素C(cystatin C,CysC)的条件并对其进行方法学评价。方法 采用液相蛋白芯片检测技术的双抗夹心法对CysC进行检测。在确定捕获抗体与检测抗体的最佳浓度组合的基础上，通过确定生物检测限与检测下限、绘制S型曲线和判断线性范围、建立标准曲线与回归方程对检测条件进行优化。对检测方法的正确度、精密度、可报告范围、分析特异性进行方法学评价。结果 液相蛋白芯片法检测CysC时捕获抗体与检测抗体的最佳浓度组合为26.6μg/mL与1∶800;检测下限和生物检测限分别为0.037和0.237 ng/mL;回归方程为y=-3.315x2+283.04x+160.89,R2=0.9921;该方法检测CysC的相对偏移为5.81%;稀释回收率为70.35%～84.91%(n=3);加标回收率为79.94%～122.41%(n=3);方法学比对实验的相关系数r=0.616,P<0.05,两种方法检测结果间的差异无统计学意义(t=0.948,P=0.358);批内精密度为3.54%～4.03%(n=10);中间精密度为12.07%～15.05%(D=5,n=3);可报告范围为0.26～3784.04 ng/mL;分析特异性试验结果显示，高、低浓度血红蛋白(160.00、71.11 g/L)对检测结果存在不同程度的干扰。结论 本研究完成了利用液相蛋白芯片检测CysC的条件优化与方法学评价。

• 单位
  中国疾病预防控制中心营养与健康所