基于DNA条形码技术的知母种子基原鉴定

作者：石林春; 金钺; 赵春颖; 王秋玲; 谢利德; 刘金欣

来源：中国实验方剂学杂志, 2018, 24(12): 21-27.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20181201

• 知母
• 种子
• DNA条形码
• psbA-trnH
• 鉴定
• 基原植物

目的:建立基于中药材DNA条形码技术的知母种子基原鉴定方法,保障知母种子基原的真实性。方法:收集知母的30份基原植物样品和9份生药材样品,获取其参考DNA条形码序列,采用克隆测序方法验证参考序列的准确性。收集51份待检测知母种子样品,获取其DNA条形码序列,基于BLAST法、遗传距离法和邻接(NJ)系统发育树法进行物种鉴定。结果:对于基原植物和生药材样品,由于基因组内存在异质性,核糖体DNA第2内部转录间隔区(ITS2)序列无法稳定获得,但可成功获得psbA-trnH序列。知母psbA-trnH序列分为6个单倍型,有3个变异位点,2处插入/缺失,种内变异最大值0.003 5,种间变异最小值0.1,在NJ系统发育树上聚为独立的支。共获得153条知母种子的psbA-trnH序列,经BLAST法、遗传距离法和NJ系统发育树法鉴定均为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides。结论:psbA-trnH是知母种子鉴定的适合条形码序列,可用于知母种子的真实性鉴定。所收集51份知母种子样品的基原均符合2015年版《中国药典》(一部)相关项下规定,未发现伪品。

• 单位
  中国医学科学院药用植物研究所; 中国中医科学院中药研究所; 国家中医药管理局; 承德医学院