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摘要
目的 通过改变人肝癌细胞HepG2中p24β1表达水平，研究该细胞中p24β1表达水平是否对高尔基体产生影响。方法 利用RNA干扰实验敲低HepG2细胞中p24β1表达（HepG2-KD），通过Western印迹检测蛋白干扰效率，实时荧光定量PCR(qPCR)验证转录水平；通过CRISPR/Cas9基因编辑系统构建同源染色体双敲除p24β12基因的HepG2细胞系（HepG2-KO），在基因组测序和Western印迹检测敲除表型后，通过CCK-8实验和克隆形成实验比较HepG2-KO与HepG2的细胞增殖活性；利用细胞免疫荧光实验分析高尔基体标志物α-N-乙酰半乳糖胺残基在细胞中的分布是否受p24β1水平影响。结果 RNA干扰后能使HepG2细胞中p24β1基因的表达下调；成功构建了同源染色体双敲除p24β1的HepG2-KO细胞系，其细胞增殖活性较HepG2无明显差异；在HepG2-KD和HepG2-KO细胞中，高尔基体呈弥散分布，并伴随片层状顺式高尔基体形态改变。结论 在肝癌细胞HepG2中，p24β1水平对于稳定高尔基体的结构至关重要，提示其对高尔基体功能具有重要调控作用。
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