5-氮杂-2′-脱氧胞苷对人结肠癌裸鼠种植瘤的抑制作用以及对种植瘤细胞CDH13表达和甲基化的影响

作者：任剑珍; 霍继荣

来源：中华肿瘤杂志, 2012, (01): 6-10.

• 结肠肿瘤
• 5-氮杂-2′-脱氧胞苷
• CDH13
• DNA甲基化

目的探讨去甲基化药物5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人结肠癌细胞及其裸鼠种植瘤生长的抑制作用,以及对种植瘤组织中CDHl3基因表达和甲基化状态的影响。方法在光镜下观察5-Aza-CdR干预前后人结肠癌HCT116细胞的形态变化,采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞生长变化。建立HCT116细胞裸鼠种植瘤模型,比较给药组(腹腔注射5-Aza-CdR)和对照组(注射等量磷酸盐缓冲液)裸鼠种植瘤生长的变化。采用甲基化特异性聚合酶链反应、逆转录聚合酶链反应、Western blot和免疫组织化学方法,检测5-Aza-CdR对裸鼠种植瘤组织CDHl3基因5′CpG岛甲基化状态、mRNA和蛋白表达的影响。结果 5-Aza-CdR对HCT116细胞的生长有抑制作用,随浓度的增加而增强。用药28 d后处死裸鼠时,给药组荷瘤裸鼠体重为(18.06±1.29)g,对照组为(17.07±0.84)g,两组差异无统计学意义(P>0.10)。给药组的肿瘤体积为(907.00±87.29)mm~3,对照组为(1370.93±130.20)mm~3,两组差异有统计学意义(P<0.01)。给药组各肿瘤组织中出现非甲基化条带,对照组仅有甲基化条带扩增。给药组结肠癌种植瘤CDHl3 mRNA和蛋白表达阳性,对照组未见CDH13mRNA和蛋白表达。结论 5-Aza-CdR能抑制人结肠癌细胞及其裸鼠种植瘤的生长,诱导种植瘤细胞CDHl3表达,其机制可能为5-Aza-CdR使甲基化的CDH13启动子去甲基化,CDH13基因重新表达,从而抑制肿瘤细胞的生长和增殖。

• 单位
  中南大学湘雅二医院