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摘要
目的应用微阵列芯片分析技术筛选脓毒症诊断和预后相关循环miRNAs,通过实时荧光定量PCR验证,并应用生物信息学方法预测脓毒症相关靶基因和发病机制。方法入选脓毒症、脓毒症休克患者及正常人各3例,提取血浆miRNA,分别与第7代人,小鼠和大鼠的miRCURY LNATMmicroRNA芯片杂交,扫描信号进行差异表达谱和聚类分析;应用qRT-PCR验证芯片结果。通过miRanda和Targetscan数据库预测miRNAs靶基因及KEGG数据库分析其通路。结果与正常组相比,脓毒症组有57种miRNAs表达上调,脓毒症休克组有11种(fold change≥2.0;P<0.05)。miR-519c-5p被用于qRT-PCR验证,结果表明其在脓毒症中表达明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。通过生物信息学方法我们预测了29个miR-519c-5p相关靶基因,通过KEGG数据库分析其中有7个作用于脓毒症相关通路。最终表明MiR-519c-5p可能正性调节细胞周期调控基因MAP2K4,通过MAPK信号通路导致血管内皮细胞凋亡。结论首次证明血浆miR-519c-5p可能可用于脓毒症诊断并作为可能潜在靶点用于脓毒症治疗。
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