Thermococcus sp.B1001环糊精酶的重组表达及在麦芽七糖制备中的应用

作者：武权; 王蕾; 吴敬; 陈晟^*

来源：基因组学与应用生物学, 2021, 40(02): 671-677.

DOI：10.13417/j.gab.040.000671

• 热球菌
• 环糊精酶
• β-环糊精
• 麦芽七糖
• 麦芽寡糖

成功构建pET-24a-tscd质粒,实现Thermococcus sp. Strain B1001来源的环糊精酶(TsCDase)在Escherichia coli BL21(DE3)中表达。通过热处理和镍柱分离对重组TsCDase进行纯化。酶学性质研究表明,重组Ts CDase的比活为1 208.04 U/mg,最适温度为90℃、最适pH值为5.5。重组酶TsCDase在85℃、90℃、95℃条件下的半衰期分别为180、120、30 min。酶转化研究表明,以80 g/Lβ-环糊精为底物,当酶转化温度为90℃、反应pH值为5.5～6.0,加酶量为25 U/g,反应时间为4 h时,麦芽七糖产率为81.19%和85.95%,七糖占产物麦芽寡糖的比例为95.24%和92.92%。本研究结果为工业化制备麦芽七糖奠定良好基础。

• 单位
  食品科学与技术国家重点实验室; 生物工程学院; 工业生物技术教育部重点实验室; 江南大学